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【科普专栏】自动凯氏定氮仪工作原理和应用实例
点击次数:3905 更新时间:2021-10-14

凯氏定氮仪是根据蛋白质中氮的含量恒定的原理,通过测定样品中总氮含量从而计算蛋白质含量的仪器。因其蛋白质含量测量计算的方法叫做凯氏定氮法,故被称为凯氏定氮仪,又名定氮仪、蛋白质测定仪、凯氏蒸馏仪、粗蛋白测定仪等。由于技术的不断进步,现有自动凯氏定氮仪及全自动凯氏定氮仪,自动化解决人力问题,减少误差,节省成为也提高工作效率。



凯氏定氮仪原理


将有机化合物与硫酸共热使其中的氮转化为硫酸铵。在这一步中,经常会向混合物中加入硫酸钾来提高中间产物的沸点。样本的分析过程的终点很好判断,因为这时混合物会变得无色且透明(开始时很暗),在得到的溶液中加入少量氢氧化钠,然后蒸馏,将铵盐转化成氨。而总氨量由样本的含氮量直接决定会由反滴定法确定:冷凝管的末端会浸在硼酸溶液中。氨会和酸反应,而过量的酸则会在甲基橙的指示下用碳酸钠。滴定所得的结果乘以特定的转换因子就可以得到结果。


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凯氏定氮仪适用范围:


格丹纳凯氏定氮仪广泛应用于食品、谷物、饲料、药品、种子、水、土壤、淤泥、肥料、烟草、沉淀物和化学品中的总氮的的含量检测,在农产品检测中心、农业技术推广站、食品企业、谷物和豆制品企业、饲料企业、烟草公司、无机化工企业中广泛应用。。具有相当好的性价比,格丹纳N310自动凯氏定氮仪自带冷却功能无需安装冷却循环水机与水龙头,节省大量水资源及成本,非常适合实验室及检验机构常规检测。广泛用于食品、农作物、种子、土壤、肥料等样品的含氮量或蛋白质含量分析。



凯氏定氮仪功能特点


1、免水冷凝技术

基于DDP(DualDragonPole)二代免水冷凝器技术,仪器无需使用自来水冷却,高水温、零水压也能有效冷凝。无需专门配置水龙头和冷水机,可在实验室内自由摆放,节约宝贵的实验室空间。样品量大的实验室每台仪器每年节约用水1200吨。


2、数据准确重现

蒸汽温度监控,保证各样品的蒸馏时间真实一致;采用蒸汽稳定技术,使测量高重复性;恒压流路系统:恒压加液,确保更准确更稳定的加样精度;1℃冷凝,水蒸汽与氨瞬间液化吸收,无损失。


3、方便灵活自动化

真彩触摸屏操作,流程显示,简便快捷;自动加酸,自动加碱,自动蒸馏,自动淋洗;蒸馏功率可调,研究型实验室的实用功能。


4、顶级的工艺制造

采用欧盟CE认证压力泵与阀门;圣戈班品牌进口管材;突破性免水冷凝技术。



凯氏定氮仪技术参数


测定范围:≥0.1mgN


回收率:≥99.5%测定速度:蒸馏时间3-10分钟/样品


重复性:≤0.5%


峰值功率:2.5kw


功率调节范围:1kw-2kw



凯氏定氮仪相关应用标准


凯氏定氮仪主要应用在哪些方面:


凯氏定氮仪是测定样品中含氮量的基本仪器,在当前社会发展的过程中,使用范围非常广泛,在各行各业中都有重要的应用。而随着近年来科学技术的发展,凯氏定氮仪具备安全、准确、可靠、省时、省力、自动化程度高等优点,在当前的测定工作中,发挥了重要的作用。凯氏定氮仪主要应用在以下几个方面:


1.蛋白质测定

格丹纳凯氏定氮仪可用于国家标准方法中,食品中的蛋白质测定、饲料中粗蛋白质的测定、植物油料中粗蛋白质的测定、谷元蛋白粉的测定等。


2.氮的测定

凯氏定氮仪还可用于国家标准中,乳与乳制品中非蛋白氮含量的测定、淀粉及其衍生物氮含量的测定、土壤中氮含量的测定、复混肥料中总氮含量的测定、肥料中铵态氮含量的测定、尿素的测定等。另外也有使用凯氏定氮仪测定水中氨氮、天然橡胶氮含量和酱油中铵盐含量的案例。


3.挥发性盐基氮测定

还有人利用凯氏定氮仪测定金枪鱼肉中的挥发性盐基氮含量,肉类中的挥发性盐基氮含量,鱼粉中的挥发性盐基氮含量,也就是利用凯氏定氮仪测定水产品、肉及其制品中的挥发性挥发性盐基氮含量及不确定度评定等。


另外也有出现应用凯氏定氮仪测定水发产品中甲醛的含量、黄花菜中二氧化硫的含量、己内酰胺中挥发碱等。由此可见凯氏定氮仪的应用范围非常广泛。



凯氏定氮仪实例


凯氏方法测定面包和烘烤类食品中蛋白质的含量


方法:

1、样品:将样品粉碎,称取2g干燥样品,精度为0.1mg,放在消化管内。

2、消化用的催化剂:

加在每一个放有试样的消化管内:7g硫酸钾K2SO4、0.21g五水硫酸铜和0.21g二氧化钛、12ml浓硫酸H2SO4(98%)轻轻摇晃消化管,将其混匀。

3、消化:420℃下消化60分钟。

4、冷却:将消化管冷却到50~60℃。

5、蒸馏:将消化管放在蒸馏装置的位置上,选择标准方法15按开始键进行蒸馏,实验中的参数如下:

系数:5.7

稀释水=75ml

H3BO3=30ml

NaOH=50ml

滴定液:HCl 0.2mol/L

6、参考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",method950.36


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凯氏方法测定燕麦,大麦,玉米,大米和黑麦中蛋白质的含量


方法:

1、样品:将样品粉碎,过20目筛子,如果要以干样品表达最终结果,则应测定样品的湿度,将样品称至1g,精度为0.1mg,放在消化管内

2、消化用的催化剂:

加在每一个放有试样的消化管内:7g硫酸钾K2SO4、0.8g五水硫酸铜CuSO4、12ml浓硫酸H2SO4(98%)轻轻摇晃消化管,将其混匀。

3、消化:420℃下消化60分钟

4、冷却:将消化管冷却到50~60℃

5、蒸馏:将消化管放在蒸馏装置的位置上,选择标准方法9按开始键进行蒸馏,实验中的参数如下:

系数:6.25

稀释水=50ml

H3BO3=30ml

NaOH=50ml

滴定液:HCl0.2mol/L

6、参考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",method979.09


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凯氏方法测定谷物及种子中蛋白质的含量


方法:

1、样品:将样品粉碎,过20目筛子,在105℃烘箱中烘干至恒重,为了能够使结果准确,可以将样品的重量称至1g样品,精度为0.1mg,放在消化管内

2、消化用的催化剂:

加在每一个放有试样的消化管内:7g硫酸钾K2SO4、5mg硒粉、12ml浓硫酸H2SO4(98%)、5ml35%的双氧水轻轻摇晃消化管,将其混匀。

3、消化:420℃下消化60分钟

4、冷却:将消化管冷却到50~60℃

5、蒸馏:将消化管放在蒸馏装置的位置上,选择标准方法7按开始键进行蒸馏,实验中的参数如下:

系数:6.25

稀释水=50ml

H3BO3=30ml

NaOH=50ml

滴定液:HCl0.2mol/L

6、参考:AOAC,“Officialmethodsofanalysis",AOAC(ed.1990),VOl.2(method950.09)


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